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光照培養(yǎng)箱多管發(fā)酵具體指哪些方面
光照培養(yǎng)箱
多管發(fā)酵具體指哪些?
一、下面我們就總結(jié)的幾個(gè)方面供大家參考下!
多管發(fā)酵法
初發(fā)酵實(shí)驗(yàn)發(fā)酵管內(nèi)裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培育液,并在內(nèi)倒置有小玻璃管。每個(gè)樣品用三個(gè)不一樣的水樣量接種,同一接種水樣量要有五管,將水樣別離接種到裝有乳糖蛋白胨培育液的發(fā)酵管中,在37℃±0.5℃下培育24h±2h。乳糖能起挑選效果,因?yàn)樵S多細(xì)菌不能發(fā)酵乳糖,而大腸菌群能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣。培育液中參加溴甲酚紫作為酸度指示劑,細(xì)菌產(chǎn)酸后,培育液即由本來(lái)的紫色變成黃色。產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管標(biāo)明實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性,如在倒管內(nèi)產(chǎn)氣不顯著,可輕拍發(fā)酵管,有小氣泡升起為陽(yáng)性。
復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)細(xì)微振動(dòng)初發(fā)酵實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性成果的發(fā)酵管,用3mm接種環(huán)將培育物(2-3環(huán))轉(zhuǎn)接到EC培育液中,在44.5℃±0.5℃下培育24h±2h(進(jìn)步培育溫度可構(gòu)成不利于來(lái)自自然環(huán)境的大腸菌群的成長(zhǎng))。培育后當(dāng)即調(diào)查,發(fā)酵管產(chǎn)氣則證實(shí)為糞大腸菌群陽(yáng)性。
2.濾膜法
濾膜是一種微孔性濾膜,孔徑0.45μm。將水樣寫入已滅菌的放有濾膜的過(guò)濾器中,經(jīng)過(guò)抽濾,細(xì)菌即被截留在膜上,然后將濾膜貼于M-FC培育基上,在44.5℃±0.5℃下培育24h±2h。糞大腸菌群菌落在M-FC培育基上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色,其他非糞大腸菌群菌完工灰色、淡黃色或無(wú)色。正常狀況下,因?yàn)闇囟群兔倒逅猁}試劑的挑選性效果,在M-FC培育基上很少見(jiàn)到非糞大腸菌菌落。
二、兩種辦法的注重事項(xiàng)
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培育溫度的需求總大腸菌群中的細(xì)菌除日子在腸道中外,在自然環(huán)境中的水與土壤中也常常存在,但此等在自然環(huán)境中日子的大腸菌群培育的最合適溫度為25℃左右,如在37℃培育則仍可成長(zhǎng),但如將培育溫度再升高至44.5℃,則不再成長(zhǎng),而直接來(lái)自糞便的大腸菌群細(xì)菌,習(xí)慣于37℃左右成長(zhǎng),如將培育溫度升高至44.5℃仍可持續(xù)成長(zhǎng)。因而,可用進(jìn)步培育溫度的辦法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)別,兩種辦法也都依據(jù)此理。將接種好的樣品或裝有濾膜的培育基放入光照培養(yǎng)箱時(shí),箱內(nèi)溫度必定要到達(dá)所需求的溫度(44.5±0.5℃)時(shí),方可放入。如用恒溫水浴箱時(shí),其水面要高于接種物面,放濾膜的培育皿要沉到水浴箱底部。
2
加氯水樣的處置經(jīng)氯處置消毒過(guò)的水樣,水中富含必定量的余氯,使大腸菌群處于受損或受按捺狀況,在收集水樣時(shí)應(yīng)提早在采樣瓶中加硫代硫酸鈉,硫代硫酸鈉能夠脫氯,使受損的細(xì)菌得以復(fù)蘇與修正,然后避免呈現(xiàn)計(jì)數(shù)成果偏低乃至假陰性的表象。此外余氯對(duì)濾膜法培育的細(xì)菌其按捺效
果尤為顯著,所以抽濾時(shí)應(yīng)對(duì)水樣進(jìn)行許多無(wú)菌水稀釋,以削減余氯的殘留。3
樣品的保管采樣用的容器運(yùn)用前應(yīng)蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置枯燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保管也很重要,如保管不妥可使樣品中的大腸菌群細(xì)菌或在必定條件下再成長(zhǎng),這些都將影響檢測(cè)成果的精確性。檢測(cè)室接到水樣后,應(yīng)當(dāng)即檢測(cè),如因故不能檢測(cè)時(shí),應(yīng)當(dāng)即將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)。
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成果核算
⑴.多管發(fā)酵法的成果是依據(jù)不一樣接種量的發(fā)酵管所呈現(xiàn)陽(yáng)性成果的數(shù)目,從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù),來(lái)核算每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的MPN值。MPN是“MostProbableNumber"的縮寫,指最大能夠數(shù),它是依據(jù)核算學(xué)理論,估量水體中的菌群密度和清潔質(zhì)量的一種辦法,所以精確判別不一樣接種量發(fā)酵管的陽(yáng)性數(shù)是非常重要的,不然將招致較大差錯(cuò)。
⑵.濾膜法的成果是計(jì)數(shù)濾膜上呈藍(lán)或藍(lán)綠色的菌落,來(lái)核算出每升水樣中的糞大腸 菌群數(shù)。所認(rèn)為便于計(jì)數(shù),削減差錯(cuò),抱負(fù)的水樣體積是一片濾膜上成長(zhǎng)20-60個(gè)糞大腸菌群菌落。
? 三、在實(shí)踐中的運(yùn)用討論
1.檢測(cè)辦法對(duì)樣品的適用性
⑴.多管發(fā)酵法因?yàn)橹恍枨笠罁?jù)水樣的取樣量來(lái)決定將樣品培育于何種培育液中(單倍或是三倍乳糖)進(jìn)行培育,因而理論上可適用于各種水樣,但因?yàn)槭馨l(fā)酵管容積的約束,其更適合檢測(cè)水源水、地表水和污染源廢水(取樣量不大),并且若是接種的水樣量不是MPN表中的三種接種量時(shí),還需用公式進(jìn)行換算。
⑵.濾膜法首要是選用抽濾設(shè)備將細(xì)菌截留在濾膜上,然后將濾膜貼附在固體培育基上培育,因而可用于檢測(cè)體積較大的水樣,但受濾膜孔徑的約束,在檢測(cè)混濁度高(污染源廢水)、非大腸桿菌類細(xì)菌密度大(河湖水)的水樣時(shí),對(duì)菌落計(jì)數(shù)核算有必定影響,此外,如水樣中有毒性物質(zhì)較高,也會(huì)在濾膜上構(gòu)成累積,按捺細(xì)菌培育。
2.檢測(cè)時(shí)刻及操作進(jìn)程的繁瑣度
⑴.多管發(fā)酵法需求經(jīng)過(guò)初發(fā)酵實(shí)驗(yàn)和復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)兩個(gè)進(jìn)程后才干依據(jù)不一樣接種量的發(fā)酵管所呈現(xiàn)陽(yáng)性成果的數(shù)目,從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù),然后最終得出每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的MPN值。能夠看出,多管發(fā)酵法的培育時(shí)刻至少需求2天以上,且對(duì)接種量、每一接種量的發(fā)酵管數(shù)都有嚴(yán)格需求(MPN表多選用9管、15管發(fā)酵管,接種量為10ml、1ml、0.1ml3種體積查詢),不然成果難以核算。
⑵.濾膜法當(dāng)前首要選用成套NPS(濾膜 培育基 培育皿)進(jìn)行細(xì)菌截留和培育,操作簡(jiǎn)略,運(yùn)用時(shí)只需用少數(shù)無(wú)菌水潮濕培育基墊即可運(yùn)用,培育時(shí)刻1天左右,能比多管發(fā)酵法更快地取得成果,還具有高度的再現(xiàn)性和精密性。此外因?yàn)檫x用單片無(wú)菌包裝,節(jié)省了滅菌時(shí)刻,還避免操作進(jìn)程中的二次污染,并且長(zhǎng)有菌落的濾膜片可在紫外線滅菌、枯燥后作為檢測(cè)記載永世保管,更契合計(jì)量認(rèn)證規(guī)范。
3.檢測(cè)本錢的思考
⑴.多管發(fā)酵法所用的發(fā)酵管、小玻璃倒管和塑料蓋可在清除、高壓滅菌和紫外線消毒后重復(fù)運(yùn)用,液態(tài)培育基可自行制造或選用市售已配好的歸納培育基,檢測(cè)的本錢不高。因?yàn)槠滢k法較繁瑣,當(dāng)前正有一種經(jīng)過(guò)USEPA認(rèn)證的水和廢水中糞大腸菌群檢測(cè)的規(guī)范辦法逐漸替代它,這種在美國(guó)、日本和加拿大等國(guó)家廣泛運(yùn)用的檢測(cè)技能在國(guó)內(nèi)也有必定運(yùn)用(北京市環(huán)境檢測(cè)中間、北京市排水集團(tuán)檢測(cè)中間等),這種辦法就是運(yùn)用IDEXXcolilert試劑來(lái)檢測(cè)水中糞大腸菌,盡管它是依據(jù)多管發(fā)酵法原理,不過(guò)卻將其操作大大簡(jiǎn)化了。當(dāng)然,伴跟著操作的簡(jiǎn)化,檢測(cè)本錢也大幅進(jìn)步,設(shè)備基本上滿是進(jìn)口的,前期投入大概在8萬(wàn)元至10萬(wàn)元人民幣之間,且因?yàn)椴蓸悠?、試劑和密封?jì)數(shù)盤都是一次性運(yùn)用,單個(gè)樣品的檢測(cè)本錢也將到達(dá)200元人民幣左右。
⑵.濾膜法首要選用的抽濾設(shè)備(拋光不銹鋼3歧管過(guò)濾器、500ml漏斗、無(wú)油隔閡真空正壓兩用泵和手動(dòng)無(wú)菌水加液器)也基本上來(lái)自于進(jìn)口,當(dāng)前許多單位運(yùn)用的都是德國(guó)賽多利斯公司出產(chǎn)的產(chǎn)物,其前期投入大概在2萬(wàn)元至3萬(wàn)元人民幣左右(包含100套無(wú)菌包裝的NPS,12元/每套)。因?yàn)槊總€(gè)樣品需選用3種不一樣的稀釋比進(jìn)行過(guò)濾培育,要運(yùn)用3套NPS,所以單個(gè)樣品的檢測(cè)本錢在50元人民幣左右。
四
主張
從兩者在幾個(gè)方面的比擬能夠看出,濾膜法具有省時(shí)、省料、設(shè)備需求低以及能夠收集較多的檢測(cè)水樣等長(zhǎng)處,并且跟著應(yīng)急檢測(cè)機(jī)制的樹(shù)立,當(dāng)需求咱們對(duì)各種突發(fā)環(huán)境污染事情(病院廢水能否加氯處置、河湖能否受日子廢水污染)敏捷做出反響,更快地取得必定成果的時(shí)分,其長(zhǎng)處越發(fā)杰出。
光照培養(yǎng)箱在多管發(fā)酵法注重事項(xiàng)
1.樣品的保管采樣用的容器運(yùn)用前應(yīng)蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置枯燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保管也很重要,如保管不妥可使樣品中的大腸菌群細(xì)菌或在必定條件下再成長(zhǎng),這些都將影響檢測(cè)成果的精確性。檢測(cè)室接到水樣后,應(yīng)當(dāng)即檢測(cè),如因故不能檢測(cè)時(shí),應(yīng)當(dāng)即將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)。
2.培育溫度的需求總大腸菌群中的細(xì)菌除日子在腸道中外,在自然環(huán)境中的水與土壤中也常常存在,但此等在自然環(huán)境中日子的大腸菌群培育的最合適溫度為25℃左右,如在37℃培育則仍可成長(zhǎng),但如將培育溫度再升高至44.5℃,則不再成長(zhǎng),而直接來(lái)自糞便的大腸菌群細(xì)菌,習(xí)慣于37℃左右成長(zhǎng),如將培育溫度升高至44.5℃仍可持續(xù)成長(zhǎng)。因而,可用進(jìn)步培育溫度的辦法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)別,兩種辦法也都依據(jù)此理。將接種好的樣品或裝有濾膜的培育基放入光照培養(yǎng)箱時(shí),箱內(nèi)溫度必定要到達(dá)所需求的溫度(44.5±0.5℃)時(shí),方可放入。如用恒溫水浴箱時(shí),其水面要高于接種物面,放濾膜的培育皿要沉到水浴箱底部。
3.加氯水樣的處置經(jīng)氯處置消毒過(guò)的水樣,水中富含必定量的余氯,使大腸菌群處于受損或受按捺狀況,在收集水樣時(shí)應(yīng)提早在采樣瓶中加硫代硫酸鈉,硫代硫酸鈉能夠脫氯,使受損的細(xì)菌得以復(fù)蘇與修正,然后避免呈現(xiàn)計(jì)數(shù)成果偏低乃至假陰性的表象。此外余氯對(duì)濾膜法培育的細(xì)菌其按捺效果尤為顯著,所以抽濾時(shí)應(yīng)對(duì)水樣進(jìn)行許多無(wú)菌水稀釋,以削減余氯的殘留。
4.培育物質(zhì)的制備與保管
?、?多管發(fā)酵法所運(yùn)用的培育液在分裝于各發(fā)酵管中后,應(yīng)將發(fā)酵管趕快放于高壓蒸汽滅菌器中,在115℃滅菌20min(注重:這個(gè)溫度也應(yīng)操控好,既到達(dá)滅菌的效果,還要避免培育物質(zhì)分化丟失),然后儲(chǔ)存于冰箱或暗處備用。
?、?濾膜法所選用的M-FC培育基多運(yùn)用外購(gòu)的制品,培育基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量往往影響菌落的色彩,因而,無(wú)菌包裝的成套培育基在運(yùn)用前,先接種典型糞大腸菌,以調(diào)查比照菌落的色彩,來(lái)判定其穩(wěn)定性。
5.成果核算
⑴.多管發(fā)酵法的成果是依據(jù)不一樣接種量的發(fā)酵管所呈現(xiàn)陽(yáng)性成果的數(shù)目,從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù),來(lái)核算每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的MPN值。MPN是“MostProbableNumber"的縮寫,指最大能夠數(shù),它是依據(jù)核算學(xué)理論,估量水體中的菌群密度和清潔質(zhì)量的一種辦法,所以精確判別不一樣接種量發(fā)酵管的陽(yáng)性數(shù)是非常重要的,不然將招致較大差錯(cuò)。
?、?濾膜法的成果是計(jì)數(shù)濾膜上呈藍(lán)或藍(lán)綠色的菌落,來(lái)核算出每升水樣中的糞大腸菌群數(shù)。所認(rèn)為便于計(jì)數(shù),削減差錯(cuò),抱負(fù)的水樣體積是一片濾膜上成長(zhǎng)20-60個(gè)糞大腸菌群菌落。
上海簡(jiǎn)戶儀器設(shè)備有限公司是一家高科技合資企業(yè),生產(chǎn)銷售鹽霧箱、恒溫恒濕機(jī)、冷熱沖擊機(jī)、振動(dòng)試驗(yàn)機(jī)、機(jī)械沖擊機(jī)、跌落試驗(yàn)機(jī)的環(huán)境試驗(yàn)儀器的公司,研發(fā)生產(chǎn)銷售經(jīng)營(yíng)各類可靠性環(huán)境試驗(yàn)設(shè)備。經(jīng)驗(yàn)豐富,并得到許多國(guó)內(nèi)外廠商的信賴與支持。
自公司成立以來(lái),多次服務(wù)于國(guó)內(nèi)外大學(xué)和研究所等檢測(cè)機(jī)構(gòu),如清華大學(xué)、蘇州大學(xué)、哈爾濱工業(yè)大學(xué)、北京工業(yè)大學(xué)、法國(guó)申美檢測(cè)、中科院物理所、中科院,SGS等**單位提供實(shí)施室方案和設(shè)備及其相關(guān)服務(wù)。努力開(kāi)發(fā)半導(dǎo)體、光電、光通訊、航天太空、生物科技、食品、化工、制藥等行業(yè)產(chǎn)品所需的測(cè)試設(shè)備裝置。公司擁有一支的研發(fā)、生產(chǎn)和售後隊(duì)伍,從產(chǎn)品的研發(fā)到售后服務(wù),每一個(gè)環(huán)節(jié)都以客戶的觀點(diǎn)與需求作為思考的出發(fā)點(diǎn)。
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簡(jiǎn)戶是集設(shè)計(jì)、銷售、研發(fā)、維修服務(wù)等為一體的綜合集團(tuán)公司,從產(chǎn)品的研發(fā)到售后服務(wù),每一個(gè)環(huán)節(jié)之間,都以客戶的觀點(diǎn)與需求作為思考的出發(fā)點(diǎn),提供的環(huán)境設(shè)備。公司創(chuàng)始人從事儀器設(shè)備行業(yè)20余年,經(jīng)驗(yàn)豐富、資歷雄厚,帶領(lǐng)簡(jiǎn)戶公司全體同仁攜手共建輝煌明天。公司成立以來(lái),積極投入電子電工,航空,航天,生物科技,各大院校,及科研單位等行業(yè)所需的產(chǎn)品測(cè)試設(shè)備裝置。
簡(jiǎn)戶擁有一支的研發(fā)、生產(chǎn)和售后服務(wù)隊(duì)伍,從產(chǎn)品的研發(fā)到售后服務(wù),每一個(gè)環(huán)節(jié)都以客戶的觀點(diǎn)與需求作為思考的出發(fā)點(diǎn),目前擁有博士學(xué)位2人,碩士5人,參與環(huán)境試驗(yàn)箱國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)起草和發(fā)行。企業(yè)制定標(biāo)準(zhǔn),行業(yè)里通過(guò)ISO9001。是中國(guó)儀器儀表學(xué)會(huì)會(huì)員和理事單位。曾榮獲CCTV《中國(guó)儀器儀表20強(qiáng)品牌》殊榮,2010年入駐上海世博會(huì)民企館。簡(jiǎn)戶自創(chuàng)辦以來(lái),參與3項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)起草與制定,獲得40+件原創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)、軟著、集成電路),6次獲得上海科技型中小企業(yè)稱號(hào),合作過(guò)3200+家合作客戶(其中世界500強(qiáng)高校600家)。
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